COLETA DE SANGUE DE RATO POR EXSANGUINAÇÃO - MUVIe - Museu Virtual de Ensino de Ciências Fisiológicas

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COLETA DE SANGUE DE RATO POR EXSANGUINAÇÃO

Objetivo: Obter sangue de ratos por exsanguinação, para ser utilizado em experimentos.

Cada rato adulto fornece aproximadamente 10 ml. As quantidades especificadas são para um total de 50 ml de sangue

Material biológico: 5 ratos adultos

Material procedimental:

solução de uretana em água destilada,100 mg/ml	Tesoura para pele
Balança para pesar ratos	5 conjuntos de seringa de vidro de 10 ml com agulha 25 X 8
seringa e agulha para injeção intraperitonial	1 ampola de heparina (Liquemine Roche), 0,25 ml=5000 U.I.
suporte para rato anestesiado	Solução Ringer ou NaCl 9 g/l
Algodão	1 béquer de aprox. 20 ml
Pinça com dentes para pele	proveta ou erlenmeyer de 50 ml

Procedimentos:

1.Preparar diluição da heparina: 1 ampola de Liquemine Roche (0,25 ml=5000 U.I.) em 10 ml de Ringer ou NaCl 9 g/l, dentro de um béquer pequeno.

Enxaguar com esta solução cada uma das seringas de vidro com agulha, deixando 1 ml em cada uma.

2.Pesar o rato e aplicar injeção intraperitonial de solução de uretana, na dose de 50 mg/100 g de peso (são 0,5 ml de solução para 100 g de peso).

O rato ficará anestesiado em menos de 5 min.

3.Colocar o rato no suporte.

4.Molhar com água os pelos do abdome. Abrir o abdome por uma incisão mediana, utilizando a pinça e a tesoura.

5.Afastar as vísceras abdominais para a direita do animal, expondo a gordura retroperitonial, atrás da qual se encontra a aorta.

6.Expor a aorta retirando a gordura retroperitonial com algodão seco.

7.Puncionar a aorta com a seringa dotada da agulha 25 X 8 e injetar a solução de heparina que nela foi colocada.

8.Extrair o sangue. Será obtido um volume de 10 ml, aproximadamente.

9.Retirar a agulha da seringa e colocar o sangue na proveta (ou erlenmeyer).

10. Lavar com água imediatamente a seringa e a agulha utilizadas.