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TRANSPORTE ATIVO EM TÚBULO RENAL

1. OBJETIVOS:

Determinar a atividade de transporte através dos túbulos renais de peixes, utilizando solução corante e verificar o efeito do cianeto do potássio na difusão renal.

2. MATERIAIS:

A) Material biológico: - Espécime de peixes, preferencialmente marinho.

B) Reagentes e equipamentos:

- Solução fisiológica.

- Solução de vermelho fenol 2,5 mg/100ml solução fisiológica.

- Solução KCN 50 mg/100ml solução fisiológica.

- Microscópio.

- Material de dissecação.

- Vidraria comum de laboratório.

3. PROCEDIMENTOS:

- Mate o peixe seccionando a medula dorsal na altura da abertura opercular.

- Disseque os rins, situado na parte dorsal da cavidade corpórea e coloque-os em uma placa de Petry contendo solução fisiológica previamente arejada e resfriada.

- Com uma tesoura fina corte os rins em pedaços pequenos e, com o auxílio de uma pequena pinça e estilete pontiagudo ou bisturi, separe os pedaços até que os fragmentos tenham menos de 1 mm de diâmetro.

- Coloque na depressão de 3 lâminas escavadas as soluções abaixo indicadas e 2 ou 3 pequenos fragmentos de tubulos renais em cada uma:

1a. Lâmina: 4 gotas de solução fisiológica

2a. Lâmina: 4 gotas de solução de vermelho fenol

3a. Lâmina: 2 gotas de solução de KCN e 2 gotas de solução de vermelho fenol

- Examine os tecidos ao microscópio no início do experimento em 5, 10, 20, 30 e 60 minutos após o início do experimento. Registre as concentrações de corante nas células (se possível), na luz do ducto ou ambas com uma escala arbitrária desde "mínima" ( + ) até "máxima" ( ++++ ).

- Discuta os resultados e a ação do KCN. Se o trabalho estiver sendo feito com peixe marinho leve em consideração que este possui praticamente só túbulo proximal. No peixe de água doce apenas cerca de 10% do túbulo é proximal.

ATENÇÃO: NÃO PIPETE A SOLUÇÃO DE KCN . EVITE QUALQUER CONTATO DIRETO COM ESTA SUBSTÂNCIA.